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ELISA实验样本处理常见错误及解决方案ELISA实验样本处理常见错误及解决方案一、样本采集与保存错误抗凝剂选择不当错误：使用肝素钠抗凝血浆时未充分混匀，导致局部凝血或纤维蛋白析出。解决：EDTA抗凝血浆需立即颠倒混匀5-8次，避免静置。保存条件不规范错误：血清/血浆反复冻融(3次)或长期置于4℃未分装，导致蛋白降解。解决：分装后-80℃保存，避免反复冻融;短期检测可2-8℃保存≤7天。溶血或脂血样本未处理错误：直接使用溶血样本(血红蛋白释放过氧化物酶干扰显色)或高脂血样本(非特异性吸附)。解决：离心后取...
2025 9-17
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ELISA实验样本处理基本步骤ELISA实验样本处理基本步骤一、样本类型与预处理血清样本采集后室温静置10-20分钟自然凝固，2000-3000转/分离心20分钟，收集上清液。若保存后出现沉淀，需再次离心。避免溶血或脂血样本，高脂血需稀释或超滤处理。血浆样本使用EDTA、肝素钠或柠檬酸钠抗凝，混合10-20分钟后离心(2000-3000转/分，20分钟)，取上清。尿液/胸腹水/脑脊液无菌管收集，离心后取上清，沉淀需复离心。细胞培养上清直接离心(2000-3000转/分，20分钟)收集上清;...
2025 9-17
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ELISA酶标板(酶联免疫吸附试验专用板)分类Elisa酶标板的分类ELISA酶标板(酶联免疫吸附试验专用板)根据材质、结构、功能等不同维度可分为以下类型：1.按材质分类聚苯乙烯(PS)板：疏水性表面，需通过表面处理(如离子接枝)增强蛋白结合能力，适用于多数ELISA实验。聚丙烯(PP)板：耐高温，适合需灭菌或高温处理的实验。聚碳酸酯(PC)板：高透光性，适用于光学检测。2.按孔板规格分类通量：96孔(常用)、48孔、384孔(高通量)、1536孔(超高通量)。可拆卸性：可拆式(如8孔/条或12孔/...
2025 9-17
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0.2ml与0.1mlpcr八连管鼓盖和平盖的区别?0.2ml与0.1mlpcr八连管鼓盖和平盖的区别?一、盖型基本区别平盖设计特点：管盖与管口平齐，表面平整优势：便于书写标记(可直接在管盖上标注样本信息)提供精确的荧光信号传递，适合实时荧光定量PCR(qPCR)密封性良好，可防止短期实验中的液体蒸发局限性：在高温循环中可能因压力导致轻微变形长期储存时密封性略逊于鼓盖鼓盖设计特点：管盖顶部呈弧形凸起优势：与PCR仪热盖接触面积大，减少热循环压力引起的管体变形密封性更优(耐-0.2MPa负压)，适合长期储存样本局限性...
2025 9-16
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为什么使用培养皿进行生物实验时，会倒置培养皿?为什么使用培养皿进行生物实验时，会倒置培养皿?培养皿倒置培养的核心原因在微生物实验中，倒置培养皿是标准化操作(SOP)，主要基于以下科学原理：防止冷凝水污染培养过程中，皿盖内侧会因温差形成冷凝水珠。正置时水滴可能携带杂菌滴落至培养基，导致污染或菌落扩散(如链状菌落难以计数)。维持培养基稳定性湿度控制：倒置减少培养基表面空气流动，延缓水分蒸发，避免琼脂干裂(正置时3-5天即可能开裂)。物理固定：刚凝固的培养基易因冷凝水冲击与皿底分离，倒置可防止滑动。操作便利性单...
2025 9-16
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ELISA板开封后的保存与避免反复冻融方法ELISA板开封后的保存与避免反复冻融方法1.短期保存(1周内使用)密封保存：开封后剩余板条需立即用铝箔袋或密封袋包裹，并加入干燥剂(如硅胶)，置于4℃冰箱保存。避免潮湿：确保密封环境干燥，防止板条受潮导致抗体失效。2.长期保存(超过1周)分装冻存：将未使用的板条分装后，密封保存于-20℃(避免-80℃反复冻融)，并标记冻存日期。干燥剂辅助：冻存时需额外加入干燥剂，防止结冰或水分残留。3.使用前的处理平衡温度：从冰箱取出后，需在室温(20...
2025 9-16
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ELISA板的基本使用流程ELISA板的基本使用流程ELISA板(酶标板)是ELISA实验的核心载体，其使用需遵循标准化操作流程，主要包括以下步骤：板条拆装与保存使用可拆卸酶标板时，轻推底部拆下所需板条，剩余板条需密封后4℃保存(避免干燥失效)。未使用的板条应连同干燥剂放回铝箔袋，密封保存于4℃冰箱。样本与标准品处理样本需离心(4℃,1000g,5分钟)去除杂质，标准品需稀释为梯度浓度(如1:2倍比稀释)。加样时每孔100μL，悬空加入避免气泡，不同浓度需更换枪头。孵育与洗涤加样后37℃...
2025 9-16
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小鼠单克隆抗体的制备过程小鼠单克隆抗体的制备过程小鼠单克隆抗体制备的核心是通过杂交瘤技术将免疫小鼠的B细胞与骨髓瘤细胞融合，筛选出能稳定分泌特异性抗体的杂交瘤细胞。以下是关键步骤与要点：1.抗原免疫小鼠抗原选择：需高纯度蛋白(90%)或偶联载体的小分子抗原(如KLH偶联多肽)。佐剂乳化：初次免疫：抗原与弗氏wanquan佐剂(FCA)乳化(油包水状态)。加强免疫：后续使用弗氏不wanquan佐剂(FIA)或直接注射抗原。免疫方案：皮下多点注射(如腋下、腹股沟)，间隔2-4周加...
2025 9-15
